当初现行标注是食物(5009.33-2016)食物清静国家尺度 食物中亚硝酸盐与硝酸盐的测定，尺度中纪律了3种措施：第一法 离子色谱法、中亚第二法 分光光度法、硝酸第三法 蔬菜、测定瓜果中硝酸盐的食物测定 。紫外分光光度法当初大少数企业会抉择运用第二法分光光度法。中亚
亚硝酸盐接管盐酸萘乙二胺法测定,硝酸硝酸盐接管镉柱复原法测定。试样经积淀卵白质、测定作废脂肪后,食物在弱酸条件下,亚硝酸盐与对于氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺巧合组成紫红色染料,外标法测患上亚硝酸盐含量。接管镉柱将硝酸盐复原成亚硝酸盐,中亚测患上亚硝酸盐总量,由测患上的亚硝酸盐总量减去试样中亚硝酸盐含量,即患上试样中硝酸盐含量。
一、硝酸试剂及尺度溶液的测定配制
试剂配制：
1 亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取106.0g亚铁氰化钾,用水消融,并稀释至1000mL。
2 乙酸锌溶液(220g/L):称取220.0g乙酸锌,食物先加30mL冰乙酸消融,用水稀释至1000mL。
3 饱以及硼砂溶液(50g/L):称取5.0g硼酸钠,中亚溶于100mL热水中,冷却后备用。
4 氨缓冲溶液(pH9.6~9.7):量取30mL盐酸,硝酸加100mL水,混匀后加65mL氨水,再加水稀释 至1000mL,混匀。调节pH 至9.6~9.7。
5 氨缓冲液的稀释液:量取50mLpH9.6~9.7氨缓冲溶液,加水稀释至500mL,混匀。
6 盐酸(0.1mol/L):量取8.3mL盐酸,用水稀释至1000mL。
7 盐酸(2mol/L):量取167mL盐酸,用水稀释至1000mL。
8 盐酸(20%):量取20mL盐酸,用水稀释至100mL。
9 对于氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4g对于氨基苯磺酸,溶于100mL20%盐酸中,混匀,置棕色 瓶中,避光保存。
10 盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中,混匀,置棕色瓶中, 避光保存。
11 硫酸铜溶液(20g/L):称取20g硫酸铜,加水消融,并稀释至1000mL。
12 硫酸镉溶液(40g/L):称取40g硫酸镉,加水消融,并稀释至1000mL。
13 乙酸溶液(3%):量取冰乙酸3mL于100mL容量瓶中,以水稀释至刻度,混匀。
尺度溶液的配制：
亚硝酸钠(NaNO2,CAS号:7632-00-0):基准试剂,或者接管具备尺度物资证书的亚硝酸盐尺度 溶液。
1 亚硝酸钠尺度溶液(200μg/mL,以亚硝酸钠计):精确称取0.1000g于110 ℃~120 ℃干燥恒 重的亚硝酸钠,加水消融,移入 500mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。
2 亚硝酸钠尺度运用液(5.0μg/mL):临用前,罗致2.50mL亚硝酸钠尺度溶液,置于100mL容 量瓶中,加水稀释至刻度。
二、样品预处置
1 乳粉、豆奶粉、婴儿配方粉等固态乳废品(不搜罗干酪):将试样装入可能容纳2倍试样体积的带盖容器中,经由一再摇晃以及颠倒容器使样品短缺混匀直到使试样均一化。
2 发酵乳、乳、炼乳及其余液体乳废品:经由搅拌或者一再摇晃以及颠倒容器使试样短缺混匀。
3 干酪:取过多的样品研磨成平均的泥浆状。为防止水份损失,研磨历程中应防止发生过多的热量。
积淀卵白质、去除了脂肪，提取制备待测液：
1 干酪:称取试样2.5g(精确至0.001g),置于150mL具塞锥形瓶中,加水80mL,摇匀,超声30min,掏出部署至室温,定量转移至100mL容量瓶中,退出3%乙酸溶液2mL,加水稀释至刻度,混匀。于4℃部署20min,掏出部署至室温,溶液经滤纸过滤,滤液备用。
2 液体乳样品:称取试样90g(精确至0.001g),置于250mL具塞锥形瓶中,加12.5mL饱以及硼砂溶液,退出70 ℃摆布的水约60mL,混匀,于滚水浴中加热 15min,掏出置冷水浴中冷却,并部署至室温。定量转移上述提取液至200mL容量瓶中,退出5mL106g/L 亚铁氰化钾溶液,摇匀,再退出5mL220g/L乙酸锌溶液,以积淀卵白质。加水至刻度,摇匀,部署30min,作废下层脂肪,上清液用滤纸过滤,滤液备用。
3 乳粉:称取试样10g(精确至0.001g),置于150mL具塞锥形瓶中,加12.5mL50g/L饱以及硼砂溶液,退出70℃摆布的水约150mL,混匀,于滚水浴中加热 15min,掏出置冷水浴中冷却,并部署至室温。定量转移上述提取液至200mL容量瓶中,退出5mL106g/L 亚铁氰化钾溶液,摇匀,再退出5mL220g/L乙酸锌溶液,以积淀卵白质。加水至刻度,摇匀,部署30min,作废下层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。
三、尺度曲线制作及亚硝酸盐测定
罗致40.0mL 上述滤液于50mL 带塞比色管中,另罗致0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、 0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50 mL 亚硝酸钠尺度运用液(至关于0.0μg、1.0μg、2.0μg、 3.0μg、4.0μg、5.0μg、7.5μg、10.0μg、12.5μg亚硝酸钠),分说置于50mL 带塞比色管中。
于尺度管与试样管中分说退出2mL4g/L对于氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3min~5min后各退出1mL2g/L盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15min,用1cm比色杯,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度,绘制尺度曲线比力。同时做试剂空缺。
四、亚硝酸盐含量合计
式中:
X1 ——试样中亚硝酸钠的含量,单元为毫克每一千克(mg/kg);
m2 ——测定用样液中亚硝酸钠的品质,单元为微克(μg);
1000——转换系数;
m3 ——试样品质,单元为克(g);
V1 ——测定用样液体积,单元为毫升(mL);
V0 ——试样处置液总体积,单元为毫升(mL)。
五、 详尽度
在一再性条件下取患上的两次自力测定服从的相对于差值不患上逾越算术平均值的10%。此措施亚硝酸盐检出限:液体乳0.06mg/kg,乳粉0.5mg/kg,干酪及其余1mg/kg。服从保存2位实用数字。
六、留意事变
①样品必需破碎捣毁平均，以便短缺提取；
②显色时，必需按挨次削减对于氨基苯磺酸以及盐酸萘乙二胺，不患上颠倒挨次；
③子细判断样品的滤液是否廓清、透明、无干扰色；若有干扰色必需妨碍样品空缺扣除了试验；
④比色管以及容量瓶等这些玻璃工具理运用稀盐酸浸泡24小时，而后用蒸馏水冲洗清洁，而后倒扣在比色管架子上，控水，让比色管做作晾干。
⑤用在紫外分光光度计上的比色皿理当处置清洁，处置的措施是浸泡在重铬酸钾溶液中，也可能浸泡在乙醇盐酸溶液中，这样处置比色皿就比力清洁了。
⑥紫外分光光度计理当做好暗电流校对于，理当延迟预热半个小时能耐运用，预热的目的是让机械更晃动，数据愈加的精确。
⑦在配制磺胺等种种溶液的时候，理当运用不含有亚硝酸盐的蒸馏水，这样能保障实验的精确，能保障实验更易乐成。
⑧在做尺度曲线的时候，可能自己配制，也可能买现成的尺度溶液，在移取的时候，可能用移液管概况是移液枪，可是要经由魔难及格，这是很紧张的。
申明：本文所用翰墨源头收集，版权归原作者所有。如波及作品内容、版权等下场，请与本网分割。